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NK細(xì)胞分選試劑盒

描述:NK細(xì)胞分選試劑盒可用于從小鼠脾臟單細(xì)胞懸液中分離未經(jīng)標(biāo)記的NK 細(xì)胞。非NK細(xì)胞(T細(xì)胞、DC 細(xì)胞、B細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、紅系細(xì)胞)被生物素化的抗體和識(shí)別生物素的磁珠標(biāo)記通過(guò)去除這些非NK細(xì)胞,從而得到高純度的NK細(xì)胞。

更新時(shí)間:2025-02-17
產(chǎn)品型號(hào):92-01-348
廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
詳情介紹

NK細(xì)胞分選試劑盒可用于從小鼠脾臟單細(xì)胞懸液中分離未經(jīng)標(biāo)記的NK 細(xì)胞。非NK細(xì)胞(T細(xì)胞、DC 細(xì)胞、B細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、紅系細(xì)胞)被生物素化的抗體和識(shí)別生物素的磁珠標(biāo)記通過(guò)去除這些非NK細(xì)胞,從而得到高純度的NK細(xì)胞。


其分選原理為:用生物素結(jié)合的單克隆抗體混合物(作為一級(jí)標(biāo)記試劑)和與磁珠結(jié)合的抗生物素單克隆抗體(作為二級(jí)標(biāo)記試劑)對(duì)非靶細(xì)胞進(jìn)行間接磁性標(biāo)記。磁性標(biāo)記的非目標(biāo)細(xì)胞在分選器的磁場(chǎng)中被保留在分選柱中,而未標(biāo)記的NK 細(xì)胞則通過(guò)分選柱流出。


<strong>NK細(xì)胞分選試劑盒</strong>



試劑和儀器要求

緩沖液(pH7.2 PBS,0.5% BSA、2mM EDTA, 2~8℃)

分選柱和分選器。

(可選)熒光偶聯(lián)的抗體用于流式分析。

(可選)PI或7-AAD可以用于流式分析中排除死細(xì)胞。

(可選)死細(xì)胞清除試劑盒用于死細(xì)胞的清除。

(可選)預(yù)分離過(guò)濾器去除細(xì)胞團(tuán)塊。


操作步驟

一、樣本準(zhǔn)備

使用手動(dòng)方法或組織解離器制備脾臟單細(xì)胞懸液。


二、磁珠標(biāo)記

1.細(xì)胞計(jì)數(shù)。

2.300xg離心10分鐘。去除上清。

3.每107個(gè)細(xì)胞總量使用 40μL緩沖液重懸。

4.每107個(gè)細(xì)胞總量添加 10μLNK細(xì)胞生物素抗體混合物。

5.混勻,2-8℃孵育  5分鐘。

6.每107個(gè)細(xì)胞加入 2mL緩沖液洗滌細(xì)胞,300xg離心10分鐘,去上清。

7.每107個(gè)細(xì)胞添加 80μL 緩沖液。

8.每107個(gè)細(xì)胞添加 20μL抗生物素磁珠。

9.混勻,2-8℃孵育 10分鐘。

10.(可選)添加染色抗體。

11.進(jìn)行細(xì)胞分選步驟。


三、細(xì)胞分選

xM或xL分選柱進(jìn)行細(xì)胞分選

1.將分選柱置于相對(duì)應(yīng)的分選器中。

2.用適當(dāng)體積的緩沖液潤(rùn)洗分選柱(xM: 500 μL; xL: 3mL)

3.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至分選柱中。收集含有未標(biāo)記細(xì)胞的流出液,即 NK細(xì)胞。

4.加適量的緩沖液,收集總流出物,并與步驟 3中的流出液混合,這是NK細(xì)胞。( xM: 500 μL;xL: 3mL)

5.(可選 )將分選柱從分選器中取出,并將其放在合適的收集管上。加適量的緩沖液到分選柱中,迅速用塞子推下,得到就是磁性標(biāo)記的非NK細(xì)胞。( xM: 1mL;xL: 5mL)

儲(chǔ)存溫度

2-8℃避光保存,請(qǐng)勿冷凍。有效期見(jiàn)試劑外標(biāo)簽。


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